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日本薬局方-一般試験法 2.22 蛍光光度法
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May 17, 2020
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日本薬局方-一般試験法 2.22 蛍光光度法
蛍光とは、物質が光を吸収した後、光のエネルギーを熱と光として発散する現象のうち、光の発散を指すものです。蛍光光度法では、試料に励起光を当て、蛍光の強さと波長を測定します。
xjorv
May 17, 2020
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Transcript
日本薬局方-一般試験法 2.22 蛍光光度法 2020/5/4 Ver. 1.0
蛍光とは? 物質が吸収した光エネルギーの一部を、光として放出する現象 光エネルギーは物質に吸収され、 • 熱 • 蛍光 • リン光* •
化学エネルギー に変換される *リン光は遅く放出される光のこと
蛍光の波長 蛍光のエネルギーは、吸収された光エネルギーより小さい = ℎ = ℎ E: 光エネルギー、h: プランク定数、υ: 振動数、λ:
波長、c: 光速 蛍光は吸収光より波長が長い → 赤色にシフトする
蛍光光度法とは? 溶液に光を当て、放出される蛍光の強度を測定する方法 = 0 F: 蛍光強度、k: 比例定数、I0 : 励起光の強さ、φ: 蛍光量子収率、ε:
モル吸光係数、c: 溶液濃度、l: セルの長さ • 比例定数、量子収率、吸光係数は定数 • 励起光・セルの長さは機械で決まる 蛍光強度は溶液の濃度に比例する
装置と操作法 蛍光分光光度計を用いる 日本分光(株)分光光度計の基礎 https://www.jasco.co.jp/jpn/technique/internet-seminar/fp/fp1.html • 1 × 1 cmの石英セルを用いる •
励起波長を変えてある波長での蛍光を連続測定する • 標準品と比較することで濃度計算する